關(guān)鍵字：中華醫(yī)學(xué)會腎臟病學(xué)分會，2018年，血液凈化論壇

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簡介： BMP-2 在堿性環(huán)境中對大鼠血管平滑肌細胞鈣化的作用
徐金升,郭利萍,張勝雷,崔立文
河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院
目的：血管鈣化在血液透析患者中很常見，且患者在透析過程中使用碳酸氫鹽透析液，使機體處于堿性環(huán)境中。本實驗通過調(diào)整培養(yǎng)基 pH 值，探討 BMP-2 在堿性環(huán)境中對高磷誘導(dǎo)大鼠血管平滑肌細胞(vascular smooth muscle cells， VSMCs)鈣化的作用。
方法：選取 60-80g 健康雄性 SD 大鼠，采用組織塊貼壁法建立 VSMCs 原代培養(yǎng)細胞系，并經(jīng)細胞形態(tài)學(xué)和 α-平滑肌肌動蛋白（ α-SMA）免疫組化染色鑒定。將細胞隨機分為對照組、高磷組、堿干預(yù)組和抑制劑組，其中對照組的細胞用正常培養(yǎng)基（ pH7.4）進行培養(yǎng)，高磷組的細胞用含有10mmol/Lβ 甘油磷酸的培養(yǎng)基（pH7.4）進行培養(yǎng)，堿干預(yù)組的細胞用含有 10mmol/Lβ 甘油磷酸的培養(yǎng)基并將 pH 值調(diào)至 7.7 進行培養(yǎng)，抑制劑組的細胞在堿干預(yù)組培養(yǎng)基中加入 BMP-2 抑制劑500ng/ml Noggin 進行培養(yǎng)。采用茜素紅染色及鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法檢測細胞鈣化情況，酶聯(lián)免疫吸附法檢測細胞堿性磷酸酶(ALP)活性， Western 印跡法檢測骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2（ bone morphogenetic protein 2， BMP?2）、 Runt 相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子 2（Runx2）蛋白的表達，反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法檢測 BMP-2、 Runx2 mRNA 的表達。應(yīng)用 SPSS17.0 軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，結(jié)果以均數(shù)±標準差表示，兩組及多組之間的比較符合獨立、正態(tài)、方差齊采用獨立樣本 t 檢驗及方差分析，不符合者采用非參數(shù)檢驗，以 P<0.05 為有統(tǒng)計學(xué)意義。??