新型急性腎損傷生物標(biāo)志物的尿液穩(wěn)定性研究(英文)
發(fā)布時間:2018-12-03 11:28:10    瀏覽量: 623
關(guān)鍵字:蛋白質(zhì),急性腎損傷,AKI,急性腎功能衰竭,ARF,生物樣本處理,蛋白穩(wěn)定性,尿生物標(biāo)志物
簡介: 背景:新型急性腎損傷尿液生物標(biāo)志物的研究呈指數(shù)增長。有效的數(shù)據(jù)解釋和研究之間的有意義比較需要了解可能對測量產(chǎn)生不利影響的因素。我們研究了短期儲存和加工的變化如何影響尿液生物標(biāo)志物的測量。
設(shè)置和參與者:來自2個地點的住院患者:耶魯紐黑文醫(yī)院(n = 50)和加州大學(xué)舊金山醫(yī)學(xué)中心(n = 36)。
預(yù)測因子:我們測試了3種尿液處理條件對這些生物標(biāo)志物的影響:(1)離心并在4℃下儲存48小時,然后在-80℃冷凍,(2)離心并在25℃下儲存48小時,然后冷凍至-80℃,和(3)未離心的樣品立即在-80℃冷凍。
結(jié)果:尿液中5種生物標(biāo)志物的濃度:中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL),白細(xì)胞介素18(IL-18),腎損傷分子1(KIM-1),肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)和胱抑素C 。
測量:我們通過建立的酶聯(lián)免疫吸附測定方法測量尿液生物標(biāo)志物。對生物標(biāo)志物值進(jìn)行對數(shù)轉(zhuǎn)換,并使用一致性相關(guān)系數(shù)(CCC)比較與立即離心和在-80℃下儲存的參考標(biāo)準(zhǔn)的一致性。
結(jié)果:在4℃下儲存樣品48小時和離心均未對測量的水平產(chǎn)生顯著影響,對于所有測試的生物標(biāo)記物,CCC高于0.9。對于在25℃下儲存48小時的樣品,在測試樣品和NGAL,胱抑素C,L-FABP和KIM-1的參考標(biāo)準(zhǔn)之間也注意到優(yōu)異的CCC值(> 0.9)。然而,在25℃下儲存48小時和參考標(biāo)準(zhǔn)的樣品之間的IL-18的CCC為0.81(95%CI,0.66-0.96)。
限制:沒有比較新鮮,未冷凍的樣品; 沒有評估蛋白酶抑制劑的作用。
結(jié)論:使用指定測定法測試的所有候選標(biāo)記物均顯示出高穩(wěn)定性,在4℃下短期儲存并且在冷凍前不進(jìn)行離心。為了獲得最佳保真度,在長期儲存或分析之前,不應(yīng)將用于IL-18測量的尿液儲存在25°C。
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