關(guān)鍵字：原發(fā)性膜性腎病，自身抗體識別，表位

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簡介： 摘要
磷脂酶A2受體1（PLA2R）是70％患有特發(fā)性膜性腎病的患者的靶自身抗原。我們描述了PLA2R的富含N-末端半胱氨酸的蓖麻毒素結(jié)構(gòu)域中主要表位的位置，其被90％的人抗PLA2R自身抗體識別。該表位對分離的蓖麻毒素結(jié)構(gòu)域中的還原和SDS變性敏感，并且對含有蓖麻毒素，II型纖連蛋白，第一和第二C-型凝集素結(jié)構(gòu)域（CTLD）的較大片段敏感。然而，在非變性條件下，表位被保護免于更大片段的減少，包括PLA2R的全長細胞外區(qū)域。為了確定表位的組成，我們通過蛋白質(zhì)印跡分離免疫反應性胰蛋白酶片段并通過質(zhì)譜法分析它們。通過表面等離振子共振測試鑒定的肽作為自身抗體與PLA2R結(jié)合的抑制劑。來自蓖麻毒蛋白結(jié)構(gòu)域的兩種肽顯示出強烈的抑制作用，較長的序列覆蓋兩種肽（31-mer），產(chǎn)生85％的自身抗體與PLA2R結(jié)合的抑制。抗PLA2R抗體在非變性條件下直接結(jié)合該31聚體肽，并且結(jié)合對還原敏感。使用電子顯微鏡和基于同源性的表示分析PLA2R和PLA2R-抗PLA2R復合物允許我們產(chǎn)生該主要表位及其抗體結(jié)合位點的結(jié)構(gòu)模型，其不依賴于pH誘導的PLA2R構(gòu)象變化。鑒定該主要PLA2R表位將使特發(fā)性膜性腎病患者的進一步治療進展成為可能，包括抗體抑制療法和循環(huán)自身抗體的免疫吸附。