關(guān)鍵字：胚胎腎祖細(xì)胞，功能性遺傳靶向

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簡介： 摘要
胚胎哺乳動物后腎間充質(zhì)（MM）是一種獨特的組織，因為它能夠響應(yīng)Wnt信號傳導(dǎo)而產(chǎn)生腎單位。將MM與輸尿管芽（UB）（天然誘導(dǎo)物）分離的離體培養(yǎng)物可用作研究腎發(fā)生的經(jīng)典腎小管誘導(dǎo)模型。然而，技術(shù)限制目前阻止使用該模型來研究分子。在小管誘導(dǎo)之前或期間的遺傳細(xì)節(jié)。使用腎單位片段特異性標(biāo)記物，我們現(xiàn)在顯示MM體外小管誘導(dǎo)也導(dǎo)致高度分割的腎臟的組裝。當(dāng)MM組織解離成細(xì)胞懸浮液然后在人重組骨形態(tài)發(fā)生蛋白7 /人重組成纖維細(xì)胞生長因子2存在下重新聚集（drMM）24小時之前，重構(gòu)該誘導(dǎo)能力，然后誘導(dǎo)。當(dāng)與UB重組時，生長因子處理的drMM也恢復(fù)了器官發(fā)生的能力。嵌合drMM培養(yǎng)物的細(xì)胞追蹤和延時成像表明，腎單位不是來自單個祖細(xì)胞。此外，病毒載體介導(dǎo)的綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)在解離的MM細(xì)胞中比在完整的間充質(zhì)中更有效，并且轉(zhuǎn)導(dǎo)的drMM祖細(xì)胞的腎源性能力得以保留。此外，用介導(dǎo)Lhx1敲低的病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)的drMM細(xì)胞被排除在腎小管之外，而摻入了用對照載體轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞?？傊?，這些技術(shù)允許在離體器官培養(yǎng)/類器官環(huán)境中對腎發(fā)生和腎臟器官發(fā)生背后的機(jī)制進(jìn)行可重復(fù)的細(xì)胞和分子檢查。