關(guān)鍵字：腎毒性化合物，定量方法
簡介： 摘要
由于藥物和環(huán)境化學(xué)物質(zhì)引起的腎毒性對患者的死亡率和發(fā)病率有重要影響，但在體外沒有高吞吐量的預(yù)測腎毒性評估方法。我們證明，原發(fā)性人類近端管狀上皮細(xì)胞（hptec）具有分化上皮細(xì)胞的特性，使其在這種體外系統(tǒng)中得到理想的應(yīng)用。為了確定一個可靠的腎毒性生物標(biāo)志物，我們對暴露于6種不同濃度的9種人體腎毒性劑后的hptec進(jìn)行了多重基因表達(dá)譜分析。只有編碼血紅素加氧酶-1（ho-1）的基因的過度表達(dá)與6種化合物的劑量增加顯著相關(guān)，9種腎毒性劑中的每一種都證實了ho-1蛋白的顯著異常。通過計算挖掘兩個大鼠腎小管毒性的毒理基因組數(shù)據(jù)庫，并通過體外三維微生理系統(tǒng)（kidneyon-a-chip）觀察毒性后HO-1的顯著增加，證明了HO-1跨物種和平臺增加的可翻譯性。使用另外一組39種不同的機械性腎毒性化合物來測試HO-1的預(yù)測潛力，盡管HO-1比傳統(tǒng)的細(xì)胞活力終點（AUC-ROC for atp=0.78；AUC-ROC for cell count=0.88）表現(xiàn)更好（曲線下的面積接收器操作員特征曲線[AUC-ROC]=0.89），但HO-1 a的組合Nd細(xì)胞計數(shù)進(jìn)一步提高了預(yù)測能力（AUC-ROC=0.92），我們還開發(fā)并優(yōu)化了一種均勻的時間分辨熒光分析法，以允許使用HO-1作為敏感生物標(biāo)志物對腎毒性化合物進(jìn)行高通量定量篩選。這種基于細(xì)胞的方法有助于快速評估潛在的腎毒性治療和環(huán)境化學(xué)物質(zhì)。
