關(guān)鍵字：腎發(fā)育，定量分析

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簡介： 分枝形態(tài)發(fā)生是腎發(fā)育的核心過程，但是除了早期器官發(fā)生之外的成像和量化這一過程提出了由于腎的生長阻止復(fù)雜結(jié)構(gòu)的成像的挑戰(zhàn)。目前對(duì)腎臟發(fā)育的分析很大程度上依賴于外植體器官培養(yǎng)和共聚焦顯微鏡可視化，因?yàn)楦影l(fā)育先進(jìn)的天然組織對(duì)于常規(guī)顯微成像而言太厚。培養(yǎng)的腎原基缺乏血管形成和正常生長的支持基質(zhì)，導(dǎo)致組織壓縮和為了解決這個(gè)問題，我們使用光學(xué)投影斷層掃描技術(shù)對(duì)離體胚胎腎臟的分支輸尿管上皮進(jìn)行成像和重建，并開發(fā)了軟件來量化這些三維（3D）數(shù)據(jù)。通過測(cè)量3D空間中的樹和末端分支長度，尖端數(shù)量，分支迭代，分支角度和尖端間距來評(píng)估輸尿管分支。為驗(yàn)證這種方法分析遺傳對(duì)腎臟發(fā)育的影響，我們?cè)u(píng)估了Tgfb2中的分支和器官形態(tài)。胚胎從E12.5到E15.5。我們發(fā)現(xiàn)分支減少，與先前使用器官培養(yǎng)的發(fā)現(xiàn)相反，并且量化了腎盂形成的主要缺陷。我們的方法通過改善通量，分析和體內(nèi)分支狀態(tài)的觀察提供了許多優(yōu)點(diǎn)，并且已經(jīng)證明其在研究腎發(fā)育疾病的基礎(chǔ)中的實(shí)用性。