關(guān)鍵字：血管加壓素，遠(yuǎn)端回旋小管，噻嗪類，氯化鈉，轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，磷酸化

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簡(jiǎn)介： 噻嗪類敏感的Na+—Cl-協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（NCC）對(duì)于腎電解質(zhì)平衡是重要的，并且其磷酸化導(dǎo)致其運(yùn)輸活性和細(xì)胞定位的增加。在這里，我們生成針對(duì)兩個(gè)保守的N-末端磷酸化位點(diǎn)（Thr53，Thr58和Thr53 / Thr58）的磷酸特異性抗體，以評(píng)估精氨酸加壓素（AVP）在體內(nèi)調(diào)節(jié)嚙齒動(dòng)物腎臟中的NCC中的作用。免疫組織化學(xué)顯示磷酸化的明顯染色。 NCC（pNCC）位于遠(yuǎn)曲小管（DCT）細(xì)胞的頂端質(zhì)膜結(jié)構(gòu)域。與總NCC不同，通過(guò)免疫金電子顯微鏡測(cè)定，pNCC僅定位于頂端質(zhì)膜。在AVP缺陷的Brattleboro大鼠中，急性deamino？Cys-1，d-Arg-8加壓素（dDAVP）暴露顯著增加頂端質(zhì)膜上的pNCC豐度約三倍，而總NCC及其細(xì)胞分布不受影響。 dDAVP顯著增加磷酸化STE20 / SPS1相關(guān)的富含脯氨酸 - 丙氨酸的激酶和氧化應(yīng)激反應(yīng)激酶（SPAK和OSR1）的豐度，這些激酶與NCC磷酸化有關(guān)。早期和晚期DCT中的細(xì)胞內(nèi)鈣水平隨著dDAVP的1分鐘灌注而增加，證實(shí)這些區(qū)段是AVP反應(yīng)性的。在喂食具有血管緊張素（ANG）1型受體阻斷的高鹽飲食的大鼠中，pNCC的類似增加在慢性或急性dDAVP后檢測(cè)到活性SPAK和OSR1，因此表明AVP的作用獨(dú)立于ANGII。我們的研究結(jié)果表明，AVP是NCC活性的有效調(diào)節(jié)劑。