關(guān)鍵字：小鼠足細(xì)胞，特異性三苯氧胺，Cre重組酶

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簡介： 摘要
背景：足細(xì)胞在維持腎小球功能正常中起著重要作用。利用表達(dá)足細(xì)胞特異性Cre重組酶的轉(zhuǎn)基因小鼠來闡明在足細(xì)胞中表達(dá)的基因的作用，建立了一種足細(xì)胞特異性條件敲除技術(shù)。然而，使用傳統(tǒng)的足細(xì)胞特異性敲除小鼠來檢測基因在某些病理?xiàng)l件下的作用可能是困難的，因?yàn)樗鼈兛赡芫哂信咛ブ滤佬曰虮憩F(xiàn)出先天性腎異常。
方法：為了在以足細(xì)胞為靶點(diǎn)的遺傳實(shí)驗(yàn)中引入時間控制，我們構(gòu)建了在足細(xì)胞特異性啟動子、人足細(xì)胞素（NPhs2）基因2.5-kb片段控制下的三苯氧胺誘導(dǎo)的Cre重組酶（Creert2）轉(zhuǎn)基因小鼠。CRE活性的特異性和效率通過將NPHS2–Creert2與Rosa26報告小鼠（r26r）雜交來檢測，在該小鼠中，β-半乳糖苷酶基因上游放置了一個浮動的停止盒。4周大的雙突變小鼠（NPhs2–Creert2/r26r）連續(xù)3天腹腔注射0.5 mg 4-羥三苯氧胺（4-oht）。